gb 4789 30-2010 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验
本标准代替GB/T 4789.30-2008《食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》。本标准与GB/T 4789.30-2008 相比,主要变化如下:——修改了标准的中英文名称;
——删除“第二法 全自动酶链荧光免疫分析仪筛选法”;
——删除“第三法 全自动病原菌检测系统筛选法”。
本标准的附录A 为规范性附录。
本标准所代替标准的历年版本发布情况为:
——GB 4789.
30-1994、GB/T 4789.30-2003、GB/T 4789.30-2008。
增菌
以无菌操作取样品25 g(mL)加入到含有225 mL LB1 增菌液的均质袋中,在拍击式均质器上连续
均质1 min~2 min;或放入盛有225 mL LB1 增菌液的均质杯中,8000 r/min~10000 r/min 均质1 min~2min。
于30 ℃±1 ℃培养24 h,移取0.1 mL,转种于10 mL LB2 增菌液内,于30 ℃±1 ℃培养18 h~24 h。
分离
取LB2 二次增菌液划线接种于PALCAM 琼脂平板和李斯特氏菌显色培养基上,于36 ℃±1 ℃培养
24 h~48 h,观察各个平板上生长的菌落。
典型菌落在PALCAM 琼脂平板上为小的圆形灰绿色菌落,周围有棕黑色水解圈,有些菌落有黑色凹陷;典型菌落在李斯特氏菌显色培养基上的特征按照产品说明进行判定。
初筛
自选择性琼脂平板上分别挑取5 个以上典型或可疑菌落,分别接种在木糖、鼠李糖发酵管,于36
℃±1 ℃培养24 h;同时在TSA-YE 平板上划线纯化,于30 ℃±1 ℃培养24 h~48 h。选择木糖阴性、鼠李糖阳性的纯培养物继续进行鉴定。