马亨德拉潘迪 马亨德拉(Hendra)酶联免疫分析试剂盒

马亨德拉(Hendra)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。                                                                        96T    使用目的:本试剂盒用于测定马血清、血浆及相关液体样本中亨德拉(Hendra)表达。

实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马亨德拉 (Hendra)表达。

用纯化的马亨德拉 (Hendra) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中亨德拉(Hendra)相结合,经洗涤除去未结 合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的亨德拉(Hendra)抗体结合,形成抗体 抗原 酶标 抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并 在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度 (OD值),与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中马亨德拉(Hendra)的存在与否。

试剂盒组成 1  30 倍浓缩洗涤液  20ml×1 瓶  7  终止液  6ml×1 瓶 2  酶标试剂  6ml×1 瓶  8  阳性对照  0.

5ml×1 瓶 3  酶标包被板  12 孔×8 条  9  阴性对照  0.5ml×1 瓶 4  样品稀释液  6ml×1 瓶  10  说明书  1 份 5  显色剂A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 张    6  显色剂 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋 1 个 马亨德拉(Hendra)酶联免疫分析试剂盒标本要求 1.

标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于 20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

马亨德拉(Hendra)酶联免疫分析试剂盒操作步骤 1.  编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照2 孔、空白对照 1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)     2.

  加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50#l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40#l,然后再加待测样品 10#l。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不 触及孔壁,轻轻晃动混匀, 3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。    4.

  配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5次,拍干。

6.  加酶:每孔加入酶标试剂50#l,空白孔除外。  7.  温育:操作同 3。    8.  洗涤:操作同 5。 9.  显色:每孔先加入显色剂 A50#l,再加入显色剂 B50#l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟.

10.  终止:每孔加终止液 50#l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.

  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。      操作程序总结:         计算和结果判定:   试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.

00; 阴性对照平均值≤0.10    临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值 0.

15    阴性判定:样品OD 值<  临界值(CUT OFF)者为亨德拉(Hendra)阴性    阳性判定:样品OD 值≥  临界值(CUT OFF)者为亨德拉(Hendra)阳性 。

  注意事项 1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

    2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15 30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物请避光保存。 6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm 7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须 注意安全。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2 8℃。 2.有效期:6个月   

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