谷胱甘肽还原酶检测试剂盒
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(Glutathione Reductase Assay Kit)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)活性的试剂盒。
谷胱甘肽还原酶在许多组织中都有分布,可以维持细胞内充足的还原型谷胱甘肽(GSH)水平。GSH可以清除自由基和一些有机过氧化物,或作为谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物来清除一些过氧化物。
谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG,并可以通过测定A412来检测TNB的生成量。
适当设置应体系,前后两个反应合并起来后,GSSG/GSH过量而GR相对不足时,该反应体系中谷胱甘肽还原酶就成为整个反应体系的限速因素,此时黄色的TNB生成量和谷胱甘肽还原酶的活性呈线性正相关。从而通过测定A412就可以计算出谷胱甘肽还原酶的活性水平。本试剂盒的具体反应原理如下:
两个反应相合并: 本试剂盒可以检测组织匀浆液上清、细胞裂解液上清等生物样品中的谷胱甘肽还原酶的活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。 包装清单:
保存条件: -20℃保存,一年有效。NADPH溶解后宜-70℃保存,4℃可以保存一天,-20℃保存一周后NADPH会减少10%以上。GSSG和DTNB在配制成溶液后,适当分装,-20℃保存。 注意事项: 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应,所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。
另外,硫酸钠、硫酸铵和铁氰化物都会干扰本试剂盒的测定。请尽量避免。 样品可以立即测定,也可以-70℃冻存待以后测定。 一定要严格控制反应时的温度,否则会引起较多误差。
NADPH不太稳定,要严格按照后续说明操作,谨防失活。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
